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實時熒光定量PCR檢測|qPCR檢測
實時熒光定量PCR檢測|qPCR檢測:RNA提取,反轉錄,實時熒光定量PCR檢測,相對定量:包括RNA提取、反轉錄和擴增,采用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式,一般采用2-ΔΔ Ct法進行計算。每個樣本重復三次,一般情況我公司提供內參基因引物。
技術服務表單下載:實時熒光定量PCR服務表單
我們專業提供qPCR檢測服務,技術精湛,價格優惠,內參免費,多臺qPCR儀,檢測速度30張96孔板/天,一般5-10天出實驗結果,承接全國各地訂單,歡迎咨詢!
熒光定量PCR技術是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時監控反應過程。隨著PCR 反應的進行,反應產物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一次熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,結合相應的軟件對產物進行分析,可以得到熒光擴增曲線,計算待測樣品初始模版的量。
實時熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍,運用該項技術,可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析。君諾德生物基于多年的經驗,可以提供mRNA 表達量水平檢測、microRNA 表達量水平檢測和基因拷貝數檢測。實驗的方法可分為SYBR Green I 法和TaqMan探針法,測定靈敏、特異性強,易于使用。
實時熒光定量PCR實驗流程:
服務項目:
1.相對定量:
對待測樣品進行某一特定基因的檢測并確定待測基因相對于某一特定管家基因以及該基因在實驗組中相對于對照組的相對表達情況。參考基因和靶基因表達分析,包括RNA提取、反轉錄和擴增,采用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式,一般采用2-ΔΔ Ct法進行計算。每個樣本重復三次,一般情況我公司提供內參基因引物。
檢測服務包括:mRNA,miRNA,lncRNA,circRNA,端粒長度檢測
2.絕對定量:
對待測樣品進行某一特定基因的檢測并確定樣本中基因的拷貝數。需要制備標準品并建立標準曲線,然后檢測目的樣本中的基因,比對標準曲線得到基因準確拷貝數,標準品制備單獨收費。DNA(RNA) 的絕對定量分析;轉基因拷貝數測定,病毒和病原量化。
3. 定性分析:
對待測樣品進行某一特定基因的檢測。檢測病毒,檢測轉基因,確定品種,突變基因分型
4. 單核苷酸多態性分析(終點法):
人類疾病分析;個性化醫療;單核苷酸多態性分析:Taqman-MGB,KASP
送樣要求:
1. 樣品要求:細胞(≥106 )、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、葉片(≥100mg)等樣品材料,基因組DNA,cDNA不少于30 μg,總RNA(體積≥20μl,濃度≥100 ng/μl)。組織需液氮速凍、細胞收獲后加入Trizol保存于-80度,樣品用干冰寄送。避免各類污染和反復凍融。
2. 詳細填寫技術服務表單,根據客戶所填寫表單信息分析實驗,報價和周期;
技術服務表單信息包括:
客戶信息:開票信息,聯系方式等;
靶基因信息:包括基因序列或GenBank Accession Number 等;
背景資料:包括生物物種信息(Human、Mouse、Rat 等)、擴增目的基因NCBI登錄號、DNA/RNA 來源、相關文獻等。
完整實驗報告,包括擴增曲線,標準曲線,溶解曲線,引物和探針及序列,電泳圖,CT值,原始數據,數據分析結果等。
收費方式:(全國范圍誠招技術服務代理商)
具體服務價格,根據不同qPCR方法,待檢測樣品數量,基因數量決定的,具體請詢價!
mRNA熒光定量檢測:
服務內容
收費方式
時間
總RNA提取及反轉錄
根據具體項目報價
2-3天
引物設計合成篩選
詢價/基因
2-5天
內參基因
一般免費,樣品和基因數太少內參算一個基因
mRNA表達量檢測(三個重復)
詢價/基因/三個重復
1-3天
數據整理
結果分析及報告整理免費
1-2天
LncRNA熒光定量檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 總RNA提取及反轉錄 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 引物設計合成篩選 | 詢價/基因 | 2-5天 |
| 內參基因 | 一般免費,樣品和基因數太少內參算一個基因 | |
| LncRNA表達量檢測(三個重復) | 詢價/基因/三個重復 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
miRNA熒光定量檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 總RNA提取及反轉錄 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 引物設計合成篩選 | 詢價/基因 | 2-5天 |
| 內參基因 | 一般免費,樣品和基因數太少內參算一個基因 | |
| miRNA表達量檢測(三個重復) | 詢價/基因/三個重復 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
circRNA熒光定量檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 總RNA提取及反轉錄 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 引物設計合成篩選 | 詢價/基因 | 2-5天 |
| 內參基因 | 一般免費,樣品和基因數太少內參算一個基因 | |
| circRNA表達量檢測(三個重復) | 詢價/基因/三個重復 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
絕對定量檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 基因組DNA提取 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 標準品構建 | 根據具體項目報價 | 2-5天 |
| 引物設計合成篩選 | 詢價/基因 | |
| 絕對定量檢測(三個重復) | 詢價/基因/三個重復 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
端粒相對長度檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 基因組DNA提取 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 引物設計合成 | 詢價/基因 | 1-2天 |
| 端粒相對長度檢測(三個重復) | 根據具體項目報價 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
端粒酶活性檢測:
| 服務內容 | 收費方式 | 時間 |
| 總RNA提取及反轉錄 | 根據具體項目報價 | 2-3天 |
| 端粒酶引物設計合成 | 詢價/基因 | 2-5天 |
| 內參基因 | 一般免費,樣品數太少內參算一個基因 | |
| 端粒酶活性檢測(三個重復) | 詢價/基因/三個重復 | 1-3天 |
| 數據整理 | 結果分析及報告整理免費 | 1-2天 |
常用網站:
1. NCBI:https://www.ncbi.nlm.nih.gov
2. DDBJ:https://www.ddbj.nig.ac.jp
3. EMBL-EBI:https://www.ebi.ac.uk
4. UCSC:http://genome.ucsc.edu
5. qPCR Primer Database:https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb
6. The real-time PCR primer and probe database:http://www.rtprimerdb.org
7. PrimerBank:https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank
8. miRBase:http://www.mirbase.org/


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